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標(biāo)題: Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹
在生命科學(xué)研究,特別是基因功能研究、蛋白表達(dá)和基因治療等領(lǐng)域,將外源核酸(DNA、RNA)高效、安全地導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)部是至關(guān)重要的實(shí)驗(yàn)步驟,這一過程稱為轉(zhuǎn)染。Polysciences公司作為國際z名的生命科學(xué)試劑與材料供應(yīng)商,憑借其深厚的技術(shù)積累,開發(fā)了一系列性能z越的轉(zhuǎn)染試劑,為全球科研工作者提供了高效、可靠的工具。以下是關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的深度解析
一、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑核心優(yōu)勢(shì)
1. 廣譜高效性
- 細(xì)胞兼容性極廣:成功驗(yàn)證于HEK293、CHO、HeLa等常見細(xì)胞系,及原代細(xì)胞、干細(xì)胞、懸浮細(xì)胞(如Jurkat)等難轉(zhuǎn)染類型。
- 多核酸適配:適用于質(zhì)粒DNA、siRNA、mRNA及CRISPR-Cas9組件,尤其擅長(zhǎng)大質(zhì)粒(>10kb) 轉(zhuǎn)染。
2. 成本效益比突出
- 價(jià)格僅為商品化試劑(如jetPEI®)的1/5-1/3,1g裝售價(jià)約$100,可配制500mL以上工作液,單次轉(zhuǎn)染成本低至$0.1。
3. 定制化靈活性
- 提供線性PEI(25 kDa) 與 支鏈PEI(25/40/60 kDa) 多分子量選擇:
- 25 kDa線性PEI:毒性低,適合原代細(xì)胞
- 40 kDa支鏈PEI:轉(zhuǎn)染效率高,適用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系
二、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑性能實(shí)測(cè)對(duì)比
指標(biāo) | Polysciences PEI | 進(jìn)口競(jìng)品(如jetPEI®) |
HEK293效率 | 85-95% | 90-98% |
CHO細(xì)胞存活率 | >80% | >85% |
懸浮細(xì)胞效率 | 60-75% (Jurkat) | 65-80% |
批間穩(wěn)定性 | 需自行質(zhì)檢 | 預(yù)質(zhì)檢認(rèn)證 |
三、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑操作關(guān)鍵點(diǎn)
1. 工作液配制
- 將PEI粉末溶解于無菌pH 4.5鹽酸溶液,煮沸10分鐘,調(diào)pH至7.0后過濾除菌(避免直接使用PBS導(dǎo)致沉淀)。
2. 轉(zhuǎn)染復(fù)合物比例
- 黃金比例范圍:
- DNA : PEI = 1μg : 2-4μg(貼壁細(xì)胞)
- DNA : PEI = 1μg : 3-6μg(懸浮/難轉(zhuǎn)細(xì)胞)
- 孵育時(shí)間:15-30分鐘(室溫)
3. 毒性控制技巧
- 轉(zhuǎn)染后6小時(shí)更換培養(yǎng)基,降低長(zhǎng)期毒性
- 難轉(zhuǎn)染細(xì)胞添加0.1mM丁酸鈉提升表達(dá)
四、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑適用場(chǎng)景推薦
- 強(qiáng)烈推薦:
- 大規(guī)模生產(chǎn)(病毒包裝、蛋白表達(dá))
- 經(jīng)費(fèi)有限的實(shí)驗(yàn)室高頻次轉(zhuǎn)染
- 大片段DNA(>15kb)遞送
- 謹(jǐn)慎使用:
- 對(duì)細(xì)胞毒性極度敏感的神經(jīng)元
- 無血清培養(yǎng)體系(需優(yōu)化復(fù)合物緩沖液)
五、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑缺陷與應(yīng)對(duì)
1. 批次差異風(fēng)險(xiǎn)
- 每批PEI需用報(bào)告基因質(zhì)粒(如pEGFP) 預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳比例。
2. 沉淀問題
- 復(fù)合物出現(xiàn)絮狀沉淀時(shí),加入5-10%葡萄糖改善分散性。
3. 支原體污染
- 購買后立即分裝凍存,使用前過濾(0.22μm)。
> 結(jié)論:Polysciences PEI是預(yù)算敏感型實(shí)驗(yàn)室的s選。其廣譜性、高載量能力和極低單價(jià)優(yōu)勢(shì)顯著,但需付出優(yōu)化成本。掌握配制與比例控制要點(diǎn)后,可穩(wěn)定獲得媲美進(jìn)口試劑的效果,特別推薦用于病毒生產(chǎn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染項(xiàng)目。
注:建議s選貨號(hào)24765-1(線性PEI 25kDa),適用性廣,毒性可控。
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